mikroskopie využívá technologie, aby se věci, které jsou velmi malé viditelné lidským okem. Vědci , kteří si prohlížejí mikroorganismy a bakterie pomocí mikroskopů někdy musí použít postup nazvaný barvení lépe vidět nebo odlišit určité části těchto mikroskopických tvorů . Samotné skvrny jsou látky, které se hlásí k buňkám , což jim barvu. Existuje několik druhů skvrn , které se hodí určité mikroskopické organismy, lepší než ostatní. K dispozici jsou jednoduché skvrny , diferenciální skvrny, gram skvrny , negativní skvrny a kyselina – rychle skvrny . Acid – Rychlé organismy a Acid – Fast Skvrny
“ Acid stálost “ odkazuje na konkrétní fyzikální vlastnosti některých bakterií , a to jejich schopnost odolávat kyseliny odbarvení během postupy barvení . Tyto rezistentní organismy se nazývají “ acid- rychlé organismy , “ a může být zabarvená pouze k prohlížení účely použití kyseliny rychlý skvrny. Existují tři hlavní skvrny používané pro úspěšné barvení acidorezistentních organismy : Ziehl – Neelsen skvrnu ; Způsob Kinyoun ; a některé fluorescenční barviva
Ziehl- Neelsen Barvení
Ziehl – . Neelsen skvrna je speciální bakteriologické skvrna , která se používá k zobrazení acidorezistentní organismy , především mykobakterií . Acid – rychlý organismy , které jsou barvené pomocíZiehl- Neelsen skvrna obrátit jasně červené . Postup pro Ziehl – Neelsen barvení je následující :
1 . Pokrýt savým papírem ( volitelně) .
2 . Zakryjte mikroskopickém sklíčku carbolfuchsin , primární skvrnu po dobu 3 až 5 minut, kdy topení s párou nebo vytápění na Bunsenovým hořákem .
3 . Vyjměte ubrousek, pokud jsou použity , odbarví snímek za použití směsi ethanolu a kyseliny chlorovodíkové . “
4 . Kontrastním použití malachitové zeleně či methylenové modři .
Kinyoun barvení
Kinyoun skvrna je další metoda používaná v barvení acidorezistentní mikroorganismy . To je podobné Ziehl – Neelsen skvrna , shlavním rozdílem, že není ohřát snímek při použití Kinyoun skvrny . Pod mikroskop , bude mořené organismy se objeví modrá postup pro použití Kinyoun skvrn je následující : . .
1 Krycí sklíčka s Kinyoun carbolfuchsin po dobu 5 minut a opláchněte vodou , dokud se z jasné
2 Krycí sklíčka s kyselinou nebo alkoholu – 3 procenta kyseliny chlorovodíkové v ethanolu – po dobu 3 minut a opláchněte opět vodou , dokud se z jasné
3 Krycí sklíčka s methylenovou modří po dobu 3 minut a . . jemně opláchněte vodou , dokud se z jasné.
4 . Nechte sklíčka uschnout před zobrazením .
Auramin – Rhodamin Barvení
Auramin -rhodamine skvrna , někdy volal Truant Auramin – rhodamin skvrnu , je technika slouží k zobrazení acidorezistentní mikroorganismy pomocí fluorescenční mikroskopie . Když jsou specifické sloučeniny osvětleny pomocí vysoce energetického světla , mají tendenci , aby vydávaly různé , nižší frekvence světla v důsledku expozice . Toto se nazývá fluorescence . Acid – rychlé mikroorganismy vydávají červeno – žlutou fluorescenci s touto metodou . Auramin – rhodamin skvrna nemusí být specifické pro acid- fast organismy, jako jsou Ziehl- Neelsen nebo Kinyoun skvrny , ale je cenově dostupnější a je často používán jako screeningový nástroj .