Elektroforézou v agarózovém gelu je metoda používaná k vizualizaci DNA , stejně jako samostatné fragmenty DNA podle velikosti . Elektroforéza využívá elektrického pole , aby se oddělil elektricky nabité molekuly . Deoxyribonukleová kyselina , nebo DNA , nese záporný náboj ; Díky tomu je možné , aby elektroforeticky tomu molekuly směrem k pozitivně nabitému pólu . Agarózovém gelu slouží jako prostředek , jehož prostřednictvím jsou molekuly DNA migraci , jak jsou od sebe odděleny elektroforézou . Vkládání Gel
elektroforézou na agarózovém gelu odděluje molekuly DNA založené na velikosti fragmentů obsažených ve vzorku . Malé otvory v horní části gelu , nazvaný “ studny „, jsou načteny s kapalinou obsahující DNA musí být posouzeny. Tento konec gelu je umístěn na anodě , nebo negativně nabitý elektrický zdroj .
Malé fragmenty
DNA fragmenty jsou vypracovány směrem ke katodě , nebo pozitivně nabitý elektrický zdroj . Jako molekuly migrují přes agarózovém gelu , začnou oddělovat podle velikosti . Nejmenší fragmenty DNA jsou ty nejnižší molekulové hmotnosti ; Tyto fragmenty jsounejrychlejší migrovat ke konci katody gelu .
větší fragmenty
fragmenty DNA větší a mají vyšší molekulovou hmotností , jsou pomalejší pohyb v agarózovém gelu ke katodě ; Proto , největší fragmenty DNA se nachází v blízkosti konce anodového gelu , zatímco nejmenší fragmenty DNA se nachází v blízkosti konce katody .
Vizualizace
DNA fragmenty mohou být vizualizovány pod ultrafialovým světelným zdrojem barvením je speciální chemické látky zvané ethidium bromid . Jsou-li vystaveny U.V. světlo , roztříštěné DNA se objeví ve formaci žebříku , s nejtěžšími a největší fragmenty DNA na horní části žebříku a nejlehčí , nejmenší fragmentů DNA ve spodní části žebříku .