Vysoce účinná kapalinová chromatografie ( HPLC ), jecenným nástrojem pro moderní organické chemiky , protože umožňuje nejen k oddělení směsi na jednotlivé složky , ale také ke kvantifikaci , kolik z každého je přítomen . I když HPLC zařízení jsou sofistikované nástroje , může být jejich výkon se postupně zhoršuje v průběhu času . Aby se zajistilo, že fungují správně a že poskytuje spolehlivé výsledky , je důležité ověřit jejich výkon pravidelně . Průtok & Tlak
čerpadla musí být schopna udržet přesné hodnoty průtoku . Testování průtoku je velmi jednoduché a vyžaduje pouze měření množství času potřebného pro sběr libovolně zvolené množství rozpouštědla ze sloupce v různých nastavení průtoku . Tlak čerpadla mohou být testovány připojením výstup čerpadla s mrtvým maticí a připojení rekordéru k měření tlaku čerpadla hlavou . Tlak by měl rychle zvýšit na asi 3000 liber na čtvereční palec ( PSI) , pak se zvýší více postupně na vyšší tlak , na kterém místě se čerpadlo automaticky vypne . Pokudtlak kolísá na 3000 PSI nebo rychle klesá počerpadlo se vypne , to obvykle znamená poruchu , jako netěsnosti v systému .
Gradient
čerpadlo musí být také schopen přesně měnit složení rozpouštědlové fáze nebo mobilní , tak za použití směsi nebo proplachovací z kolony stále více nepolární sloučeniny, jako procentní podíl méně polární rozpouštědla se zvyšuje . Gradient přesnost je testována pomocí dvou kanálů najednou , jeden z nich poskytuje čisté rozpouštědlo a ostatní rozpouštědla s rozpuštěnou sledovacího chemikálie, jako je kofein . Protože koncentrace druhé zvyšuje řešení , můžete změřit ultrafialové ( UV ) absorbance výstupu sloupce a použít tato data k ověření správnosti přechodu .
Injector modul
přesnost vstřikovače modulu může být testována provedením šest replik injekci s jedním vzorkem ; významné rozdíly ve výsledcích naznačují , že máte problém . Některé experimenty zahrnují variabilní objem injekce , takže to je také důležité otestovat schopnost vstřikovač je k tomu odpovídající množství vzorku . Prováděním injekce přes mikrolitrů rozmezí 0 až 100 ,chemik může získat a vytisknout data a určit vztah mezi výsledky a koncentrací vzorku . Slabá korelace naznačuje poruchu .
Detector Module
záznamy detektor modul absorbance pro rozpuštěné látky a elučního rozpouštědla nebo proudící ze spodní části kolony , takže její přesnost je obzvláště důležité pro zajištění dobré výsledky . Mnoho HPLC nástroje zahrnují schopnost vestavěný ověřovací vlnová délka zajistit,vlnová délkadetektoru používá, jestejná jako ta, kterou jste si vybrali . Další test zahrnuje použití řady vzorků, které obsahují zvyšující se koncentraci sloučeniny , jako je kofein . Chemik pak lze vykreslit výsledky proti koncentraci zkoušeného roztoku a určit sílu korelace . Slabá korelace naznačuje poruchu .